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酶法分析技術在食品行業的應用

發布時間: 2019-03-27  點擊次數: 1160次

 目前,酶法分析技術已經在我國被廣泛應用,如在蔬菜、食品、果汁、乳業、酒業、糖業、飼料、發酵、制藥、調味品等加工生產中作為產品質量控制、成品質量檢驗及加工、制藥等工藝工程研究分析的主要手段,藥物研發機構中作為產品質量控制和生產過程監控的手段。這主要是因為它有著操作簡單,快速準確,特異性強,能夠定量分析檢測的顯著特點,得到世界很多國家的認可,并且被多個國家寫入法規。
    隨著科學技術日新月異的發展,目前市場上推出了一種液體裝即用型酶法分析試劑盒,與以往的干粉酶法試劑盒相比,這種試劑盒有著以下顯著的特點:一是所有試劑均為液體劑型,即時可用,不需溶解和配制,克服了上一代普通干粉裝試劑盒的一些缺點:如部分試劑(如酶或NADP)是凍干粉,使用前要先溶解,使用后要冷凍保存,尤其是保質期僅為2-3個月,每次檢測樣品前要先融化,這樣不僅降低酶的活性,而且影響酶促反應和檢測準確度;推出新一代的液體裝即用型試劑盒不存在這些問題,而且核心的酶也是液體型的,不需冷凍保存,可直接使用,保質期達到12月以上,檢測的穩定性和重復性大大提高,三是液體裝即用型試劑盒可以采用儀器進行自動化檢測,有效減少試劑用量,增加測試數,成倍降低檢測成本。以上特點,便使液體裝酶法分析試劑盒取代普通干粉試劑盒有著不可逆轉的優勢。
    隨著酶法應用的標準化,酶法分析在貿易中變得尤為重要。而在我國,目前標準水平總體來說偏低,所以我們有必要去借鑒上已經成熟的標準體系。《貿易技術壁壘協議》明確規定:一切需要有技術規則或標準的地方,締約方均應以這些的技術規則或標準作為制訂本國技術規則或標準的依據。這也是我們出口商品的需要。

在以下的標準及法規中,大量的酶法檢測方法被采用和推廣:
ISO ( 標準組織)

ISO 2963(1997) 乳酪的化學分析方法:乳酪及乳酪加工品中的檸檬酸濃度的測定(酶法).ISO 4133(1979) 肉及肉制品中葡萄糖酸內酯濃度的測定(相關方法)
ISO 4134(1999) 肉及肉制品中L-谷氨酸濃度的測定(相關方法)ISO 8069(1986) 無水牛奶及無水牛奶制品中乳酸及乳酸鹽的測定
ISO 8451(1991) 番茄中淀粉濃度的測定(酶法)ISO 11213(1995) 改良淀粉中乙酰基濃度的測定(酶法)
ISO 13965(1998) 肉及肉制品中淀粉及葡萄糖濃度的測定(酶法)ISO/DIS 5765-1 奶粉,冰淇淋粉及乳酪加工品中乳糖濃度的測定,酶法檢測乳糖中葡萄糖的濃度
ISO/DIS 5765-2 奶粉,冰淇淋粉乳酪加工品中乳糖濃度的測定,酶法檢測乳糖中半乳糖的濃度 

 

AOAC (美國化學分析聯合會)

 

AOAC Official 牛奶中乳糖的測定 Method 984.15 (酶法)   

AOAC Official 酒中葡萄糖及果糖的測定 Method 985.09(酶法)

AOAC Official 酒中檸檬酸測定 Method 985.11 (酶法)     

AOAC Official 蘋果酸中L-蘋果酸比例的測定 Method 993.05 (酶法)

 

IFU (果汁生產者協會)

IFU 21 L-蘋果酸的測定 (酶法), 1985   

IFU 22 L-檸檬酸的測定 (酶法), 1985   

IFU 22 乙醇的測定型 (酶法) 1996

IFU 53 D/L-乳酸的測定 (酶法),1996   

IFU 54 D-異檸檬酸的測定 (酶法),1984   

IFU 55 葡萄糖的測定 (酶法), 1985

IFU 55 果糖的測定 (酶法), 1985   

IFU 56 蔗糖的測定 (酶法), 1998   

IFU 62 山梨醇的測定 (酶法),1995

IFU 64 D-蘋果酸的測定 (酶法),1995   

IFU 66 乙酸的測定 (酶法),1996   

IFU 76 葡萄汁中D-葡萄糖酸的測定,2001

IFU 77 葡萄汁中甘油的測定,2001 starch enzymatic recommended

 

OIV (酒業協會)

葡萄糖及果糖的測定(酶法)   

甘油的測定 (酶法)

L-/D-乳酸的測定 (酶法)

檸檬酸的測定 (酶法)

L-蘋果酸的測定 (酶法)

D-蘋果酸的測定 (酶法)

 

IDF (乳品委員會)

IDF 34C(1992) 乳酪,乳酪加工品及牛奶中檸檬酸的測定(酶法)    

IDF 69B(1987) 無水牛奶中D-/L-乳酸的測定(酶法)

IDF 79B(1991) 乳酪加工品,乳清粉中乳糖及D-半乳糖的測定(酶法)  

IDF 79B(1991) 無水牛奶,無水冰淇淋混和物有乳清粉中乳糖及D-葡萄糖的測定(酶法)

IDF 97A(1984) 牛奶制品及乳清粉中硝酸鹽/(硝酸根)的測定(酶法)    

IDF 175(1995) 牛奶中乳糖/D-葡萄糖的測定(酶法)

 

EBC (歐洲啤酒釀造公約)

低酒精度啤酒及無酒精度啤酒中乙醇的測定(酶法)   

啤酒中硝酸鹽的測定(酶法)   

啤酒中總二氧化硫的測定(酶法)

啤酒中乙酸的測定(酶法)

啤酒中甘油的測定 (酶法)

啤酒中乳酸的測定 (酶法)

 

MEBAK (Mitteleuropaische Brautechnische Analysenkommission-Central European Brewing Committee for Analysis)

ASBC Methods of Analysis (American Societ of Brewing Chemists)

低酒精度啤酒的檢測(酶法) (方法)—頒布日期 1991年

 

ICUMSA (糖制品標準方法委員會)

ICUMSA method GS 2/3-35 精制糖制品中亞硫酸鹽的測定(酶法)

ICUMSA method GS 8/1/2/3/4-19 總α-半乳糖酶及蜜三糖的測定(酶法)

ICUMSA method GS 8/4/6-4 甜菜汁中葡萄糖及果糖的測定(酶法)

ICUMSA method GS8/4/6-13 乳酸的測定(酶法)

ICUMSA method GS8/4/6-14 甜菜汁中乙酸的測定(酶法)

European Norms (歐盟成員國均執行此標準)

EN 1137 (1995) 水果汁及蔬菜汁中檸檬酸(鹽)含量的測定:NADH 分光光度法

EN 1138 (1995) 水果汁及蔬菜汁中L-蘋果酸(鹽)含量的測定: NADH 分光光度法

EN 1139 (1994) 水果汁及蔬菜汁中D-異檸檬酸含量的測定: NADH 分光光度法

EN 1140 (1995) 水果汁及蔬菜汁中D-果糖含量的測定: NADH 分光光度法

EN 1988 (1998) 亞硫酸鹽的測定 (酶法)

EN-ISO 8069(2001) 無水牛奶中乳酸及乳酸鹽含量的測定    

EN-ISO11213(1995) 改良淀粉中乙酰基含量的測定(酶法)

EN 12014-3(1998) 肉制品中硝酸鹽及/或亞硝酸鹽含量的測定(用酶還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,而后用分

光光度計檢測)

EN 12014-5(1998) 含蔬菜的嬰幼兒食品中硝酸鹽及/或亞硝酸鹽含量的測定(酶法)

EN 12138 (1998) 水果及蔬菜汁中D-蘋果酸含量的測定NAD 分光光度法.

EN 12146 (1997) 水果及蔬菜汁中蔗糖含量的測定NADP 分光光度法

EN 12631 (1999) 水果及蔬菜汁中D-乳酸及L-乳酸(鹽)含量的測定NAD 分光光度法

EN 12632 (1999) 水果及蔬菜汁中乙酸(鹽)含量的測定NAD 分光光度法.    

EN -ISO13965 肉及肉制品中淀粉及葡萄糖含量的測定(酶法)

 

DIN (German Norms - additional not covered by EN)

DIN 10325 (1986) 乳酪制品中檸檬酸的測定(酶法)    

DIN 10326 (1986) 牛奶及牛奶制品中蔗糖及葡萄糖的測定(酶法)

DIN 10344 (1982) 牛奶及牛奶制品中乳糖及半乳糖的測定(酶法)   

DIN 10335 (1987) 牛奶及牛奶制品中D-/L-乳酸的測定(酶法)

DIN 10381 (1979) 淀粉及淀粉制品中D-葡萄糖及D-果糖的測定(酶法)   

DIN 10471 (1997) 牛奶及牛奶制品中D-葡萄糖酸的測定(酶法)

DIN 10476 (2000) 牛奶制品中硝酸鹽及亞硝酸鹽的測定(酶法)    

DIN 54604-1 (1988) 紙及紙板中淀粉的測定(酶法)  

  

    涉及的檢測樣品種類包括各類蔬菜、水果及加工品、啤酒、白酒、葡萄酒及其他飲料;各種糕點、面包類食品、巧克力、各種糖、肉食及各類加工發酵食品;各類奶及奶制品、蜂蜜、調味品、發酵產品及其他生物樣品、動物飼料等等。具體項目包括L-乳酸、D-乳酸、D/L-乳酸、乙酸、L-抗壞血酸、L-谷氨酸、D-蘋果酸、L-蘋果酸、異檸檬酸、檸檬酸、乙醇、尿素/氨、膽固醇、β-羥丁酸、葡萄糖酸、葡萄糖/果糖、蔗糖/葡萄糖/果糖、葡萄糖、乳糖/半乳糖、麥芽糖、甘油、淀粉、L-肉堿、甘露醇、丙酮酸、酮體、可溶性纖維、游離SO2、鐵、銅、總SO2和亞硫酸鹽等物質等。

 

已經應用的產品包括:

產品名稱及用途 檢測物質
D-葡萄糖檢測試劑盒 D-Glucose Enzymatic Test kit (F)  葡萄糖
D-葡萄糖/D-果糖檢測試劑盒 D-Glu/D-Fru/Sucrose Enzymatic Test kit(F)葡萄糖/果糖
D-葡萄糖/D-果糖/蔗糖檢測試劑盒D-Glu/D-Fru Enzymatic Test kit(F)葡萄糖/果糖/蔗糖
乳糖/半乳糖檢測試劑盒Lactose/Galactose Enzymatic Test kit(F)乳糖/半乳糖
甘露醇檢測試劑盒 D-Mannitol Enzymatic Test kit (F) 甘露醇
L-蘋果酸檢測試劑盒 L-Malic acid Enzymatic Test kit(F)L-蘋果酸
乙酸檢測試劑盒 Acetic acid Enzymatic Test kit(G)乙酸
L-乳酸檢測試劑盒 L-Lactic acid Enzymatic Test kit(F)L-乳酸

 

D/L-乳酸檢測試劑盒 D/L -Lactic acids Enzymatic Test kit(F)D/L-乳酸
D-葡萄糖酸檢測試劑盒 Gluconic acid Enzymatic Test kit(F)D-葡萄糖酸
甘油檢測試劑盒 Glycerol Enzymatic Test kit(F)甘油
乙醇檢測試劑盒 Ethanol Enzymatic Test kit(F)乙醇
氨檢測試劑盒 Ammoniac Enzymatic Test kit(F)
淀粉檢測試劑盒 Starch Enzymatic Test kit(F)淀粉
膳食纖維檢測試劑盒Total Dietary Fiber(F)(AOAC方法)膳食纖維
尿素-氨檢測試劑盒Urea-ammoniac Enzymatic Test kit(F)尿素-氨
丙酮酸檢測試劑盒Pyruvic acid Enzymatic Test kit(F)丙酮酸
檸檬酸檢測試劑盒Citric acid Enzymatic Test kit(G)檸檬酸
L-肉堿檢測試劑盒L-Carnitine Enzymatic Test kit(G)肉堿
酮體檢測試劑盒Ketonic bodies Enzymatic Test kit(F)酮體
Sulfite Colorimetric Test kit亞硫酸鹽檢測試劑盒亞硫酸鹽
Free  SO2 Colorimetric Test kit游離SO2檢測試劑盒游離SO2
Totle SO2 Colorimetric Test kit總SO2檢測試劑盒總SO2
Iron Colorimetric Test kit鐵檢測試劑盒重金屬鐵
Copper Colorimetric Test kit銅檢測試劑盒重金屬銅
Tartric acid Colorimetric Test kit(F) 酒石酸檢測試劑盒酒石酸
pH Colorimetric Test kit(F) 酸堿度檢測試劑盒酸堿度
Total acidity Colorimetric Test kit(F) 總酸度檢測試劑盒總酸度
Primary Amino Nitrogen Colorimetric Test kit(F) 氨基酸態氮檢測試劑盒氨基酸態氮(PANOPA)

 

    此外,在葡萄酒行業相當發達的歐洲,葡萄酒的檢測也是經常用到的。法國柏桑特公司就這方面專門組織研發力量研制出了葡萄酒檢測試劑盒(包括蘋果酸、乳酸、葡萄糖/果糖、酒石酸),并且在法國本地葡萄酒行業的生產和質控已被廣泛采用,有效提高了葡萄酒加工生產中產品質量控制、成品質量檢驗和蘋乳發酵過程中酸的監測效率。尤其是重復使用這類檢測試劑盒在這些不同的生產過程中可確保符合成本效益的生產高品質的產品。在我國,酒類行業檢測還相當落后,各個關鍵過程及控制點的控制不嚴格,在加上我國的標準混亂,致使我國酒業很難與接軌。為了促進我國葡萄酒健康發展,幫助企業建立生產過程監控體系,北京泰樂祺科技優先公司引進了法國柏桑特(BioSenTec) 公司研發的葡萄酒酶法分析試劑盒,為國內葡萄酒生產企業在蘋乳發酵等生產葡萄酒過程提供新的監控手段。該產品均為全液體裝即用型產品,值得一提的是該品不僅適用于快速檢測葡萄酒、果汁有機酸、糖類物質的含量,還可用于果汁生產中的檢測,適合于手動和自動化使用。

 

以下是此次引進產品列表:

葡萄酒蘋果酸檢測試劑盒 Malic Acid Enzymatic Test kit (F)蘋果酸
葡萄酒乙酸檢測試劑盒 Acetic Acid Enzymatic Test kit (F)乙酸
葡萄酒葡萄糖/果糖檢測試劑盒 Glucose / Fructose Enzymatic Test kit (F)葡萄糖/果糖
葡萄酒L-乳酸檢測試劑盒 L-Lactic Acid Enzymatic Test kit (F)L-乳酸

 

 

    在過去很長的一段時間里,由于我國的技術法規和標準過低,實驗技術相對落后,一方面,已成為制約我國產品出口的瓶頸。由于技術壁壘的提高,我國出口企業不同程度遭遇國外技術壁壘的限制。受國外技術性貿易措施影響較大的農、食行業損失嚴重。近年來美國、日本和歐盟等國家和地區不斷制定更嚴格和更廣泛的標準,我國農產品對這些國家的出口難度在加大。另一方面,由于我國相當一部分農產品標準低于標準,有的甚至沒有具體的技術要求,在對進口農產品進行檢驗時,只進行極為普通的一般項目衛生檢驗,其他國家不合格的產品因符合我國的標準就可以堂而皇之地進入中國市場,很難起到有效保護國內產業的作用。 
    他山之石,可以攻玉。隨著經濟一體化進程的加快,我們更應借鑒發達國家先進的實驗經驗,制定和應用相應的實驗技術標準,盡快建立起完備的技術標準體系,筑起保護市場和消費者利益的“質量長城”。

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